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一、怎样规范无菌操作
（一）生物安全柜及垂直层流台内的无菌技术 1、操作人员应严格遵守SOP有关着装、洗手和正确使用安全柜的规定。 2、准备好调配所需的物料。 3、在应用前检查所有的物品包装、容器和器械设备，确认其完好无损。 4、在物料放入洁净室前，必须先用浸有75%乙醇的无菌纱布擦拭整个操作台，物料进出安全柜的次数应最小化。 5、所有物品的安放应便于调配。合理划分工作区域，明确留下中央区域用来操作。如果一次要配一袋以上，其摆放必须合理，防止混淆。 6、在安全柜内侧至少15cm处做所有的无菌操作，这一距离可防止来自于工作人员身体的反射性污染，以及来自于层流室内两个气流相互作用产生的干扰气流的回流污染，牢记高效过滤器的气流是从（身体的）远侧端到近侧端，而且在关键的位置决不能干扰高效滤过气流。 7、制定良好的工作计划：尽可能靠近滤器端做最重要的工作。 8、所有的操作中，手指和手都必须刻意地放在关键位置的气流下方，也就是它的后面，否则将会干扰气流并可能使手指上的污染直接进入关键部位。 9、在插入针头前，西林瓶和输液袋的胶塞表面、加药口、安瓿的颈部必须用75%乙醇消毒。 10、当持有连接器做接通操作时，应与气流成直角进行，同样也需要保持手在关键部位的后面。 11、调配要尽可能快，必须保持无菌状况，进出安全柜的次数应达到最小化。 12、避免任何物质喷射入高效过滤器内。打开安瓿的方向应远离高效过滤器，调整注射器容量和传递导管时也要小心。 13、最后，对配好的产品应检查是否缺损，及有无任何不相容的物理性变化或降解。
（二）注射器、针头、西林瓶、安瓿的无菌技术 1、请在生物安全柜或垂直层流台内打开注射器与针头的外包装。 2、西林瓶：用75%乙醇消毒胶塞时，应以固定的手法、相同的方向：在胶塞的同一点上用针尖及斜面后部穿刺；由于西林瓶是封闭性容器。所以应注入与吸出的液体容量相同体积的空气；当向粉末中加入稀释剂时，必须去除与稀释剂量等容的空气以防在操作西林瓶时产生正压。 3、安瓿：合理打开安瓿，用75%乙醇消毒后，用拇指及食指握住安瓿的颈部。在远离身体处以快速、固定、突然折断的方法来打开它，打开时不要对着高效过滤器，从安瓿中抽取药物，倾斜安瓿，将针尖斜面置于接近开口的角上，拉回注射器推杆以抽取溶液。
二、无菌操作名词解释
1、无菌操作名词解释：指在无菌室或超净台中进行以防止微生物进入人体的操作技术。
2、无菌操作是各种生物操作和生产实践中一项重要的基本操作。无菌操作的要求是：操作前将操作空间中的细菌和病毒等微生物灭掉，操作过程中保证操作空间与外界隔离，避免微生物的侵入。
3、环境要清洁，进行无菌操作前半小时，须停止清扫地面等工作。避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。
4、执行无菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，并将手擦干，注意空气和环境清洁。
5、夹取无菌物品，必须使用无菌持物钳。进行无菌操作时，凡未经消毒的手、臂、均不可直接接触无菌物品或超过无菌区取物。
6、无菌物品必须保存在无菌包或灭菌容器内，不可暴露在空气中过久。无菌物与非无菌物应分别放置。无菌包一经打开即不能视为绝对无菌，应尽早使用。凡已取出的无菌物品虽未使用也不可再放回无菌容器内。
7、无菌包应按日期顺序放置在固定的柜橱内，并保持清洁干燥，与非灭菌包分开放置，并经常检查无菌包或容器是否过期，其中用物是否适量。
8、以上内容参考：百度百科-无菌操作
三、什么是无菌操作
1、所谓的无菌操作，是指接种操作的空间、使用的器皿和工具、操作的衣着和手，不能沾染任何活的微生物，以保证接种材料不沾染杂菌的整个接种操作过程，也是菌种分离、转扩中的重要技术环节之一。其具体操作如下：
2、（1）接种前必须使待接种物冷却到适宜温度（28～30℃）防止高温接种热死菌种。同时要对接种箱（室）进行清洁消毒，并准备好接种工具。
3、（2）将已灭菌冷却过的待接种物（试管、瓶、袋）及各种需有物品提前搬入接种箱（室）内，用药物熏蒸，有条件的可用紫外线灯灭菌20～30分钟或用环境消毒器灭菌30分钟，效果会更好。
4、（3）接种人员在操作前穿上无菌工作服、工作鞋，带好口罩和工作帽，若没有的也可以换一套清洁的衣服。再用新洁而灭溶液表面消毒，同时用消毒液洗手，然后带菌种或分离物进入接种室（箱）。
5、（4）接种操作前，用70%酒精棉球擦手、菌种容器表面、工作台面及接种工具，再点燃酒精灯开始接种操作。操作时，要思想集中，严格认真，动作要轻，尽量减少空气流动。
6、（5）接种结束，及时搬出所有物品，收拾干净。若要连续使用，必须重新进行全面的消毒灭菌。
四、无菌技术操作的名词解释
1、无菌操作，是指在无菌室或超净台中进行以防止微生物进入人体或污染供试菌的操作技术。无菌操作是各种生物实验和生产实践中一项重要的基本操作。
2、无菌操作的要求是：操作前将操作空间中的细菌和病毒等微生物杀灭；操作过程中保证操作空间与外界隔离，避免微生物的侵入。
3、用于防止微生物进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作。如外科手术需防止细菌进入伤口．在各种生物实验中，为了防止微生物地生长和繁殖影响实验的进行，也要在无菌的环境下进行。
五、无菌技术的操作原则是什么
无菌技术操作包括以下几个原则：
1、清洁和消毒：在进行无菌操作前，必须确保操作区域和工具的清洁和消毒，以防止微生物的污染。
2、避免直接接触：尽量避免手直接接触操作物品，使用无菌手套、无菌器械等，以减少可能的菌源。
3、使用无菌工具：使用已经通过消毒或灭菌的无菌工具和容器，避免使用可能被污染的工具和容器。
4、控制操作环境：在进行无菌操作时，应尽量减少空气中的微生物数量，可以采取洁净室等环境控制手段。
5、防止交叉污染：在进行无菌操作时，要避免不同物品之间的交叉污染，比如使用无菌剪刀剪开包装物等。
6、快速操作：在进行无菌操作时，应尽量控制操作时间，减少操作时机会接触到空气和其他环境中的微生物。
7、检测和验证：进行无菌操作后，需要进行适当的检测和验证，以确保操作的无菌性。
1、细胞培养：细胞培养是生物医学研究中常用的实验技术，无菌技术在细胞培养中起到至关重要的作用。它可用于制备无菌的培养基、维持细胞培养器具的无菌状态、处理细胞药物和传代细胞等操作。
2、微生物学：在微生物学实验中，无菌技术可以用于处理和传播细菌、真菌、病毒等微生物。例如，利用无菌技术可以制备无菌培养基，培养菌落及单孢等。
3、分子生物学：分子生物学是研究生物分子结构和功能的一门学科，无菌技术在分子生物学实验中起到重要作用。例如，在DNA/RNA提取、PCR扩增、基因克隆等实验中，需要无菌条件下对试剂、仪器和反应体系进行操作。
4、药物研发：在药物研发过程中，无菌技术被广泛应用于药品的制备和质量控制。无菌技术可用于制备无菌药剂，以确保药品无菌性；同时，在药品质量控制与检测中，无菌技术也可以用于进行菌落计数、药品容器的无菌测试等。
5、外科手术：无菌技术在医学外科手术中具有重要意义。在手术过程中，医生和护士需要保持无菌状态，以避免引入细菌和其他致病菌，从而减少术后感染的风险。
六、无菌技术操作原则包括哪些
进行无菌技术操作前半小时，须停止清扫地面等工作，避免不必要的人群流动，减少人员走动，以降低室内空气中的尘埃。防止尘埃飞扬。治疗室每日用紫外线照射消毒一次，时间20~30分钟即可，也可适当延长消毒时间。
衣帽穿戴要整洁。帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。必要时穿好无菌衣，带好无菌手套。
无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品不可暴露在空气中，必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌物品一经使用后，必须再经无菌处理后方可使用，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。
无菌物品必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌包应注明无菌名称，消毒灭菌日期，有效期一周为宜，并按日期先后顺序排放，以便取用，放在固定的地方。无菌包在未被污染的情况下，可保存7天，过期应重新灭菌。无菌物品一经使用或过期，潮湿应重新进行灭菌处理。
操作者身距无菌区20cm，取无菌物品时须用无菌持物钳（镊），不可触及无菌物品或跨越无菌区域，手臂应保持在腰部以上。无菌物品取出后，不可过久暴露，若未使用，也不可放回无菌包或无菌容器内。疑有污染，不得使用。未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区。
如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，应更换或重新灭菌。一物一人，一套无菌物品，只能供一个病员使用，以免发生交叉感染。
参考资料来源：百度百科—无菌技术操作原则
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